《水質(zhì) 石油類(lèi)的測(cè)定 熒光分光光度法》（征求意見(jiàn)稿）
Waterquality-Determinationofpetroleumoils-Fluorescencespectrophotometricmethod
 
前 言
為貫徹《中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)法》、《中華人民共和國(guó)水污染防治法》和《中華人民共和國(guó)海洋環(huán)境保護(hù)法》，保護(hù)環(huán)境，保障人體健康，規(guī)范水中石油類(lèi)的測(cè)定方法，制定本標(biāo)準(zhǔn)。
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中石油類(lèi)的熒光分光光度法。
本標(biāo)準(zhǔn)為發(fā)布。
本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境監(jiān)測(cè)司、科技標(biāo)準(zhǔn)司組織制訂。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：天津市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)中心、環(huán)境保護(hù)部環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)研究所。
本標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證單位：北京華測(cè)檢測(cè)技術(shù)有限公司、國(guó)家海洋局天津海水淡化與綜合利用研究所、河北省秦皇島環(huán)境監(jiān)測(cè)中心、海南省環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站、廣西壯族自治區(qū)海洋環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站、浙江省舟山海洋生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)站。
本標(biāo)準(zhǔn)生態(tài)環(huán)境部20□□年□□月□□日批準(zhǔn)。
本標(biāo)準(zhǔn)自20□□年□□月□□日起實(shí)施。
本標(biāo)準(zhǔn)由生態(tài)環(huán)境部解釋。
【生態(tài)環(huán)境部 發(fā)布】
 
水質(zhì)石油類(lèi)的測(cè)定熒光分光光度法警告：實(shí)驗(yàn)中所使用的正己烷具有一定毒性，應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行操作，同時(shí)按規(guī)定佩戴防護(hù)器具，避免接觸皮膚和衣服。
1. 適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中石油類(lèi)的熒光分光光度法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水和海水中石油類(lèi)的測(cè)定。
當(dāng)取樣體積為500ml，萃取液體積為25ml，使用1cm比色皿時(shí)，方法檢出限為0.005mg/L，測(cè)定下限為0.020mg/L。
2. 規(guī)范性引用文件
本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件或其中的條款。凡是未注明日期的引用文件，其有效版本適
用于本標(biāo)準(zhǔn)。
HJ493 水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定
HJ/T91 地表水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范
HJ/T164 地下水環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范
GB17378.3 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運(yùn)輸
3. 術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
石油類(lèi)petroleum oils
指在pH≤2的條件下，能被正己烷萃取不被硅酸鎂吸附，且在激發(fā)波長(zhǎng)為310nm，發(fā)射波長(zhǎng)為360nm處有熒光響應(yīng)的物質(zhì)。
4. 方法原理
在pH≤2的條件下，用正己烷萃取樣品中的油類(lèi)物質(zhì)，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉脫水后，再用硅酸鎂吸附除去動(dòng)植物油類(lèi)等極性物質(zhì)，其中的石油類(lèi)物質(zhì)經(jīng)激發(fā)光源照射，分子產(chǎn)生躍遷，當(dāng)分子從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)的振動(dòng)能級(jí)時(shí)，以熒光形式釋放吸收的能量發(fā)出分子熒光。熒光強(qiáng)度在一定濃度范圍內(nèi)與石油類(lèi)含量成正比。
5. 試劑和材料
除非另有說(shuō)明，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?，?shí)驗(yàn)用水為蒸餾水或去離子水。
5.1鹽酸：ρ（HCl）=1.19g/ml。
5.2正己烷（C₆H₁₄），色譜純。
5.3無(wú)水乙醇（C₂H₆O）。
5.4無(wú)水硫酸鈉（Na₂SO₄）。
于550℃下灼燒4h，冷卻后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器內(nèi)貯存。
5.5硅酸鎂（MgSiO₃）：60目~100目。
于550℃下灼燒4h，冷卻后稱(chēng)取適量硅酸鎂于磨口玻璃瓶中，根據(jù)硅酸鎂的重量，按6%（m/m）的比例加入適量蒸餾水，密塞并充分振蕩數(shù)分鐘，放置12h，備用。
5.6石油類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=1000mg/L。
直接購(gòu)買(mǎi)市售正己烷體系適用于熒光分光光度法測(cè)定的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
5.7石油類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=100mg/L。
吸取10.00ml石油類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.6）于100ml容量瓶中，用正己烷（5.2）定容，搖勻，臨用現(xiàn)配。
5.8玻璃棉。
用正己烷（5.2）浸洗并晾干，置于干燥玻璃瓶中，備用。
5.9硅酸鎂吸附柱。
將內(nèi)徑10mm、長(zhǎng)約200mm的玻璃層析柱出口處填塞少量玻璃棉（5.8），再將硅酸鎂（5.5）緩緩倒入玻璃層析柱中，邊倒邊輕輕敲打，填充高度約為80mm。
6. 儀器和設(shè)備
6.1采樣瓶：500ml棕色硬質(zhì)玻璃瓶。
6.2熒光分光光度計(jì)：激發(fā)波長(zhǎng)250～700nm；發(fā)射波長(zhǎng)250～700nm。
6.3比色皿：1cm石英熒光比色皿。
6.4分液漏斗：1000ml，聚四氟乙烯旋塞。
6.5錐形瓶：50ml，具塞磨口。
6.6水平振蕩器。
6.7離心機(jī)：配備玻璃離心管。
6.8一般實(shí)驗(yàn)室常用器皿和設(shè)備。
7. 樣品
7.1樣品的采集
參照HJ/T91、HJ/T164和GB17378.3的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行樣品的采集。用采樣瓶（6.1）采集樣品。樣品采集好后，加入鹽酸（5.1）酸化至pH≤2。
7.2樣品的保存
參照HJ493和GB17378.3的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行樣品保存，如樣品不能在24h內(nèi)測(cè)定，應(yīng)在5℃以下冷藏保存，7d內(nèi)測(cè)定。
7.3試樣的制備
7.3.1萃取
將樣品全部轉(zhuǎn)移至1000ml分液漏斗（6.4）中，量取25.0ml正己烷（5.2）洗滌樣品瓶后，全部轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。充分振搖2min，期間經(jīng)常開(kāi)啟旋塞排氣，靜置分層后，將下層水相全部轉(zhuǎn)移至1000ml量筒中，測(cè)量樣品體積并記錄。
注1：乳化程度較重時(shí)，可向除去水相后的萃取液中滴加適量無(wú)水乙醇（5.3）破乳，若效果仍不理想，可將其轉(zhuǎn)移至玻璃離心管中，轉(zhuǎn)速2000r/min離心3min。
注2：可采用自動(dòng)萃取裝置代替手動(dòng)萃取。
7.3.2脫水
將萃取液（7.3.1）轉(zhuǎn)移至已加入3g無(wú)水硫酸鈉（5.4）的錐形瓶（6.5）中，蓋緊瓶塞，振搖數(shù)次，靜置。若無(wú)水硫酸鈉（5.4）全部結(jié)塊，需補(bǔ)加無(wú)水硫酸鈉（5.4）直至不再結(jié)塊。
7.3.3吸附
繼續(xù)向萃取液（7.3.2）中加入3g硅酸鎂（5.5），置于水平振蕩器（6.6）上，振蕩20min，靜置沉淀。在玻璃漏斗底部墊上少量玻璃棉（5.8），過(guò)濾，待測(cè)。
注：也可采用硅酸鎂吸附柱（5.9）進(jìn)行吸附。將萃取液（7.3.2）通過(guò)硅酸鎂吸附柱（5.9），棄去前2~3ml濾液，待測(cè)。
7.4空白試樣的制備
以實(shí)驗(yàn)用水代替樣品，按照試樣的制備步驟（7.3）制備空白試樣。
8. 分析步驟
8.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
準(zhǔn)確移取0.00ml、0.10ml、0.50ml、1.00ml、5.00ml和10.00ml石油類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.7）于6個(gè)50ml容量瓶中，用正己烷（5.2）稀釋至標(biāo)線，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為0.00mg/L、0.20mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、10.0mg/L和20.0mg/L。在激發(fā)波長(zhǎng)為310nm，發(fā)射波長(zhǎng)為360nm條件下，使用1cm石英熒光比色皿（6.3），以正己烷（5.2）作參比，測(cè)量熒光強(qiáng)度。以石油類(lèi)濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
注：儀器參數(shù)按照儀器說(shuō)明書(shū)推薦值進(jìn)行設(shè)置。
8.2試樣的測(cè)定
按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立（8.1）相同步驟進(jìn)行試樣（7.3）的測(cè)定。
注：當(dāng)試樣熒光強(qiáng)度大于曲線高點(diǎn)時(shí)，用正己烷（5.2）稀釋試樣，再經(jīng)硅酸鎂（5.5）吸附后測(cè)定。
8.3空白試樣的測(cè)定
按照分析步驟（8.2）進(jìn)行空白試樣（7.4）的測(cè)定。
9. 結(jié)果計(jì)算與表示
9.1結(jié)果計(jì)算
水中石油類(lèi)的質(zhì)量濃度ρ（mg/L）按照公式（1）計(jì)算：
 
公式(1)：ρ=(A-A₀-a)×V₁÷(b×V)    
式中：ρ——水中石油類(lèi)的質(zhì)量濃度，mg/L；
A——試樣的熒光強(qiáng)度；
A₀——空白試樣的熒光強(qiáng)度；
a——標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距；
V₁——萃取液體積，ml；
b——標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率；
V——水樣體積，ml。
9.2結(jié)果表示
結(jié)果保留小數(shù)位數(shù)與檢出限一致，多保留三位有效數(shù)字。
10. 精密度和準(zhǔn)確度
10.1精密度
六家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)配制濃度為0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L和1.00mg/L的統(tǒng)一樣品進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為：2.7%～7.7%、1.3%～8.9%、1.3%～5.3%、0.3%～3.9%；實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：7.9%、3.7%、2.4%和8.0%；重復(fù)性限分別為：0.007mg/L、0.013mg/L、0.014mg/L和0.061mg/L；再現(xiàn)性限分別為：0.013mg/L、0.015mg/L、0.018mg/L和0.223mg/L。
11. 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制
11.1空白試驗(yàn)
每批樣品應(yīng)至少做一個(gè)空白，測(cè)試結(jié)果應(yīng)低于方法檢出限。
11.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.999。
11.3準(zhǔn)確度
每批樣品至少分析一個(gè)質(zhì)控樣品，測(cè)定結(jié)果應(yīng)在給定的保證值范圍內(nèi)。
12. 廢物處理
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的廢液和廢物應(yīng)分類(lèi)收集并委托具有資質(zhì)的單位處置。
13. 注意事項(xiàng)
13.1石英熒光比色皿壁上的沾污會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。每次使用前，應(yīng)檢查石英熒光比色皿的
潔凈度。
13.2樣品與空白試樣制備所使用的正己烷應(yīng)為同一批號(hào)。